描述:带有N端Flag和Avi标签的重组人AMPKα1与带有N端GST标签的重组人AMPKβ2蛋白和重组人AMPKγ1蛋白共表达,同时进行体内生物素化。Biotin-AMPKα1/β2/γ1蛋白通过Flag亲和层析进行纯化。Biotin-AMPKα1/β2/γ1蛋白在HTRF检测中显示出高活性。
种属:Human
标签:AMPKα1: N-terminal Flag and Avi tag; AMPKβ2: N-terminal GST tag; AMPKγ1: No tag
表达系统:HEP sf9
Uniprot:AMPKα1: Q13131-1; AMPKβ2: O43741-1; AMPKγ1: P54619-1
序列:AMPKα1: M1-Q559(end); AMPKβ2: M1-I272 (end); AMPKγ1: M1-P331 (end)
分子量:AMPKα1: 67.1 kDa; AMPKβ2: 57.0 kDa; AMPKγ1: 37.6 kDa
储存液:50 mM Tris, 150 mM NaCl, 1 mM DTT, 0.05% Brij35, 10% glycerol, pH7.5
状态:液体
纯度:>90%
稳定性和储存条件:自收到之日起在-80℃下可稳定保存12个月,避免反复冻融。
SDS-PAGE:
活性验证:HTRF法检测Biotin-AMPKα1/β2/γ1蛋白的活性:将Biotin-AMPKα1/β2γ1蛋白、ATP和底物在25℃下孵育60分钟,加入对应的供体和受体,并在25℃下孵育60分钟,最后在BMG上读取665/620信号。
注意:
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